近日,南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科研究人員發(fā)表論文,旨在觀察以25kDa線性聚乙稀亞胺(linear plyethylenimine,L-PEI)和分枝PEI(branched PEI,B-PEI)作為表達(dá)綠色熒光蛋白的質(zhì)粒pEGFP-C1的載體,轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)新生C57BL/6J小鼠基底膜的效果。研究指出,L-PEI可作為轉(zhuǎn)染新生小鼠耳蝸基底膜細(xì)胞的非病毒載體,但需要進(jìn)一步優(yōu)化獲得更好的轉(zhuǎn)染效果。該文發(fā)表在2014年第03期《聽(tīng)力學(xué)及言語(yǔ)疾病雜志》上。
25kDa線性或分枝PEI與質(zhì)粒在5%葡萄糖溶液或PBS溶液中形成納米粒子后,行透射電鏡觀察納米粒子表征;按相同方法制備納米粒子,行凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)并在培養(yǎng)的293T細(xì)胞中行MTT毒性測(cè)試,選擇毒性較小的PEI類型作為質(zhì)粒載體在293T細(xì)胞檢測(cè)其轉(zhuǎn)染效果;以適條件用其轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)新生C57BL/6J小鼠耳蝸基底膜并行熒光鏡觀察。
在相同條件下,B-PEI轉(zhuǎn)染能力略強(qiáng)于L-PEI,但L-PEI毒性明顯低于B-PEI;在PBS中制備的L-PEI-pDNA納米粒子的毒性小于在葡萄糖溶液中制備的該粒子毒性;L-PEI-pDNA納米粒子在適宜濃度范圍可以轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)新生小鼠耳蝸基底膜的螺旋緣纖維細(xì)胞、螺旋神經(jīng)元、支持細(xì)胞,但轉(zhuǎn)染效率不高。
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